name of GOD

 به نام خدا

هدف از ازمایش

"بررسی عوامل فیزیکوشیمیایی بر فعالیت انزیم"

اثر دما بر فعالیت انزیمی

وسایل ازمایش

لوله ازمایش . معرف  یدیدوره. .حمام اب یخ  . محلول امیلاز . نشاسته..بن ماری.گیره

مقدمه

اثر دما بر فعالیت انزیم

آنزیم های اکثرا پروتئینی هستند و با کاهش انرژی فعال سازی واکنش های شیمیایی باعث افزایش سرعت واکنش می شوند و در آخر هم بدون مصرف باقی می مانند آنزیم ها کاتالیزورهای سیستم های بیولوژیکی هستند و  موجب تبدیل اشکال مختلف انرژی بهم دیگر می شوند.lاز مشخصّات قابل توّجه آنزیم ها قدرت کاتالیزوری بالا و اختصاصی بودن آنها بوده و بعلاوه فعّالیّت عدّه زیادی از آنزیم ها قابل تنظیم می باشد.تقریباً تمامی آنزیم های شناخته شده ، ساختمان پروتئینی دارند ولی کشف مولکولهای RNA فعّال از نظر کاتالیزوری نشان داد که فقط پروتئین ها نمی توانند کاتالیزورهای بیولوژیکی مطلق باشند

به استثنای ریبوزیم، همهٔ آنزیم های شناخته شده ، دارای ساختمان پروتئینی هستند. برخی آنزیم ها ، پروتئین های ساده بوده و مرکب از زنجیره های پلی پپتیدی هستند. مثالهایی از این نوع آنزیم ها ، آنزیم های هیدرولیتیک پپسین ، تریپسین  و … هستند

محل تولید آنزیم a آمیلاز: 

محل سنتز آنزیم آمیلاز، پانکراس و غدد بزاقی است. بیماریهای مربوط به این آنزیم در این ارگانها پانکراتیت و اوریون هستند. علائم اوریون ، تورم غدد بزاقی بوده و به علت اینکه تشخیصی منحصر به فرد است نیازی به آزمایش آنزیم آمیلاز نداریم و با مشاهده علائم تشخیص نهایی داده می شود. علامت پانکراتیت ، دل درد است و به علت اینکه این علامت می تواند مربوط به بسیاری دیگر از بیماریها باشد، حتما آزمایش آنزیم آمیلاز در تشخیص نهایی مورد نیاز است.

شرح کار

در این ازمایش انزیم ها در دمای کمتر از 50 درجه دناتوره نمی شود و ب افزایش انرزی جنبشی و در نتیجه افزایش برخوردها و قرت برخوردها باعث افزایش سرعت می شود ولی در دمای بالای 50 درجه باعث دناتوره شدن انزیم می شود و سرعت کاهش می یابد.دمای مطلوب برای انزيم مورد نظر 37 درجه می باشد

عوامل فزیکوشیمیایی موثر در فعالیت انزیم ها به سه دسته میتوان تقسیم کرد:

اثر مهار کننده ها بر فعالیت انزیم

اثر PH بر فعالیت انزیمی

اثر دما بر فعالیت انزیم

فعالیت یک آنزیم که از طریق مقدار ماده اولیه ای که به ماده پایانی تبدیل می کند،اندازه گیری می شود،تحت

تاثیر عوامل زیادی قرار می گیرد. دما و میزان اسیدی محیط دو عامل مهم اثر گذار بر شدت فعالیت یک آنزیم هستند.

هر آنزیم در یک دمای مطلوب و خاص خود قادر است که حداکثر فعالیت را داشته باشد. به طور کلی ،یک افزایش جزئی در دمای بدن بر شدت فعالیت اکثر آنزیمها می افزاید. این ویژگی آنزیم از آن جهت مطلوب است  که دما بدن به هنگام فعالیتهای ورزشی افزایش پیدا می کند، افزایش فعالیت آنزیم فرایند انرژی زایی زیستی (تولیدPTA) را از طریق سرعت دادن به واکنشهای درگیر در تولید انرژی مفید زیستی ، تقویت می کند. از طریق دیگر کاهش دمای بدن یا افزایش بیش از حد مطلوب آن سبب کاهش فعالیت آنزیمها می شود.

PH مایعات بدنی اثر بارزی روی فعالیت آنزیمها دارد. ارتباط میان PH و فعالیت آنزیمها مانند ارتباط دما و آنزیمها است، به این معنی که، هر آنزیم دارای یک PH مطلوب است . اگر PH از مقدار مطلوب تغییر کند از میزان فعالیت آنزیم کاسته می شود. برای مثال ، هنگام اجرای یک فعالیت ورزشی سنگین ترکم اسید لاکتیک در مایعات  بدن زیاد می شود. اسید لاکتیک  یک اسید نسبتا قوی است و موجب کاهش PH مایعات ، خیلی بیشتر از حد مطلوبی می شود که آنزیمها می توانند در فرایند انرژی مفید برای انقباض عضلانی کاسته می شود. در واقع،اسیدی شدن شدید محیط یک عامل محدود کننده  و بازدارنده در بسیاری از فعالیتهای ورزشی سنگین است.

آنزیم های اکثرا پروتئینی هستند و با کاهش انرژی فعال سازی واکنش های شیمیایی باعث افزایش سرعت واکنش می شوند و در آخر هم بدون مصرف باقی می مانند آنزیم ها کاتالیزورهای سیستم های بیولوژیکی هستند و  موجب تبدیل اشکال مختلف انرژی بهم دیگر می شوند.lاز مشخصّات قابل توّجه آنزیم ها قدرت کاتالیزوری بالا و اختصاصی بودن آنها بوده و بعلاوه فعّالیّت عدّه زیادی از آنزیم ها قابل تنظیم می باشد.تقریباً تمامی آنزیم های شناخته شده ، ساختمان پروتئینی دارند ولی کشف مولکولهای RNA فعّال از نظر کاتالیزوری نشان داد که فقط پروتئین ها نمی توانند کاتالیزورهای بیولوژیکی مطلق باشند

به استثنای ریبوزیم، همهٔ آنزیم های شناخته شده ، دارای ساختمان پروتئینی هستند. برخی آنزیم ها ، پروتئین های ساده بوده و مرکب از زنجیره های پلی پپتیدی هستند. مثالهایی از این نوع آنزیم ها ، آنزیم های هیدرولیتیک پپسین ، تریپسین  و … هستند

ابتدا در 4 لوله ازمایش 4 سی سی نشاسته 1 درصد و 2 سی سی محلول امیلاز ریخته و به ترتیب مواد را اماده میکنيم و واکنش ها را در 4 لوله بررسی مکنیم لولهی اول را در اب یخ لولهی دوم را در بن ماری 37 درجه که دمای اوپتیمم ما است و لوله سوم را در دمای ازمایشگاه 25 درجه و لوله ی چهارم را در اب جوش 100 درجه می گذارییم بعد از 7 دقیقه لوله ها را بلافاصله در حمام اب یخ می گذارییم.و به هر کدام 1 قطره معرف ید یدوره می افزاییم سبس ان ها را سر و ته کرده و مخلوط مکنیمو نگاه مکنیم کدام یک رنگ بنفش ابی را تشکیل داد که کمترین رنگ ابی نشان دهنده ی بیشترین فعالیت انزیم در ان محیط استو ان دمای 37 درجه ی اوپتیمم است

مکانیسم:

نشاسته ß   آمیلاز آن را هیدرولیز می کند به ß ساکاریدهای کوچک

باقیمانده نشاسته + محلول ید = کمپلکس رنگی

تئوری آزمایش

ابتدا در 4 لوله ازمایش 4 سی سی نشاسته 1 درصد و 2 سی سی محلول امیلاز ریخته و به ترتیب مواد را اماده میکنيم و واکنش ها را در 4 لوله بررسی مکنیم لولهی اول را در اب یخ لولهی دوم را در بن ماری 37 درجه که دمای اوپتیمم ما است و لوله سوم را در دمای ازمایشگاه 25 درجه و لوله ی چهارم را در اب جوش 100 درجه می گذارییم بعد از 7 دقیقه لوله ها را بلافاصله در حمام اب یخ می گذارییم.و به هر کدام 1 قطره معرف ید یدوره می افزاییم سبس ان ها را سر و ته کرده و مخلوط مکنیمو نگاه مکنیم کدام یک رنگ بنفش ابی را تشکیل داد که کمترین رنگ ابی نشان دهنده ی بیشترین فعالیت انزیم در ان محیط استو ان دمای 37 درجه ی اوپتیمم است

نتیجه

در دمای بالا ی 50 درجه به علت دناتوره شدن انزیم هیدرولیز شده ولوله به رنگ ابی است در دمای 0 درجه رنگ بنفش ایجاد شده چون عمل نکرده به خاطر سرعت و شدت برخورد کم در دمای 25 درجه کمی انزیم عمل کرده ولی مطلوب نیستو محلول تا حدودی کم رنگ است ولی در دمای 37 درجه و اوپتیمم کاملا بیرنگ شده و بیشترین فعالیت را داشته البته این دما فقط برای انزیم امیلاز مناسب است....نه برای همه انزیم ها....

نظرات شما عزیزان:

نام :

آدرس ایمیل:

وب سایت/بلاگ :

متن پیام:

نظر خصوصی

 کد را وارد نمایید:

 

 

 

عکس شما

آپلود عکس دلخواه: